دستورالعمل روش انجام آزمایش VIT A با متدCMIA

کد سند:
کد یکتا:
359
واحد سازمانی:
هورمون شناسی
فرآیند:
فرآیند انجام آزمایش
زمان ویرایش:
1395/01/24
ویرایش کننده:
مدیر ارشد آزمایشگاه
شماره بازنگری:
3.0
ضمیمه - مرجع:
توضیحات:

متن سند:
هدف:

حصول اطمینان از تعیین صحیح میزانVIT A  در خون بیماران بر اساس روش  (Chemiluminescence immunoassay (CLIA.

دامنه کاربرد:

این دستورالعمل جهت اندازه گیری کمی آنالیتVIT A در نمونه سرم یا پلاسمای انسان توسط دستگاه Liason در بخش هورمون آزمایشگاه کاربرد دارد .

صلاحیت و شایستگی کاربر: 

جهت حصول اطمینان از نحوه صحیح این آزمایش توسط پرسنل بخش، مطالعه کامل این دستورالعمل همراه با گذراندن دوره آزمایشی به مدت 7 روز کاری یا حداقل 5 RUN کاری تحت نظر مسوول بخش مربوطه الزامی است.

اقدامات وابسته : 

آگاهی اساس آزمایش VIT A به روش CLIA
آگاهی از محدوده رفرانس آنالیتVIT A در سرم و تغییر مقدار آن در بیماری های مختلف
آگاهی از برنامه کنترل کیفی آزمایشگاه
آشنایی با اپراتوری و تحلیل نتایج دریافت شده از دستگاه
آگاهی از اصول ایمنی در آزمایشگاه 

نمونه لازم و موارد رد نمونه :

نمونه سرم یا پلاسمای هپارینه یا EDTA
نمونه نباید همولیز ، لیپمیک و یا ایکتریک باشد.
نمونه باید شفاف و فاقد هر گونه Clot و یا رشته های فیبرین باشد.
حداقل حجم مورد نیاز برای سنجش VIT A  توسط دستگاه Liason مقدار 50 میکرولیتر می باشد.
ذخیره سازی نمونه در دمای 2-8°c به مدت7 روز
ذخیره سازی نمونه در دمای -20°c  جهت نگهداری بیش از 7 روز
نمونه های ذخیره شده در فریز بعد از دفریز شدن باید توسط ورتکس، همگن شوند.
از فریز کردن نمونه هایی که قبلاً دفریز شده اند به شدت اجتناب شود .

لوازم مورد نیاز :

کیت مورد نظر ساخت شرکت Diasorin
دستگاه ایمونوآنالایزر Liason
دستکش های یکبار مصرف

اساس آزمایش :
در پدیده کمی لومینسانس واکنش شیمیایی باعث تهییج الکترون ها می شود ولی حاصل این تهییج مشابه فلورسانس بوده و در حین بازگشت الکترون به سطح پایه انرژی ، نور نشری پدید می آید . در کمی لومینسانس ترکیبات آلی اکسید می شوند. این ترکیبات از قبیل لومینول و ایزولومینول می باشند که با یک عامل اکسید کننده ( مثل پراکسید هیدروژن ، هیپوکلرید یا اکسیژن ) واکنش کامل شده و نورنشری از فراورده های تهییج شده در واکنش اکسیداسیون حاصل می آید .
این واکنش ها در حضور کاتالیزور ها از قبیل آنزیم ها ، یون های فلزی و یا کمپلکس های فلزی و hemin انجام می شود .

روش انجام آزمایش :

کیت مورد نظر را حداقل نیم ساعت قبل از انجام آزمایش در جایگاه خود قرار دهید.
نمونه ها را به ترتیب در A-Rack قرار دهید و A-Rack  را در جایگاه مخصوص خود جا بزنید.
از روی مانیتور شماره بیمار و نوع تست را انتخاب کنید.
دستگاه را start کنید.

تفسیر نتایج :

 منظور از ويتامين A رتينوئيدهايي هستند كه فعاليت بيولوژيكي رتينول را دارند. ويتامين A يك ويتامين محلول در چربي ضروري است كه براي حفظ تماميت سلول هاي اپي تليال مورد نياز بوده و نقش مهمي در چرخه بينايي دارد. دو شكل طبيعي براي ويتامين A وجود دارد: رتينول (ويتامين A1) و 3- دهيدرورتينول (ويتامين A2) .
بتاكاروتن شايع ترين پروويتامين A متشكل از 60-50 تركيب شناخته شده بوده و حدود 25% از كل كاروتنوئيدهاي سرم را شامل مي شود. 

 بيمار بايد حداقل 8ساعت ناشتا باشد

در لوله سردشده (chilled) نمونه گيري شود.نمونه را دور از نور و روي يخ قرار دهيد.

 سرم يا پلاسما را در C°4 سانتريفوژ كرده و بلافاصله در يك ويال پلاستيكي منجمد نماييد.بصورت يخ زده تا 2سال پايدار خواهد بود.4هفته درC ° 4 پايدار خواهد بودهرچند فريز كردن ارجح است. نمونه از نور دور نگه داشته شود.

تشخيص افتراقي هيپروتيامينور A كه ممكن است شامل سميت نيز باشد.سطوح ويتامين A كمتر ازµg/dl 10 ممكن است شاهدي از فقدان واضح باشددر حالي كه سطوح بيشتر از µg/dl 140 نشانه سميت خواهد بود.
كمبود ويتامين A شايع تر از همه در كودكان زير 5 سال ديده مي شود و معمولا ناشي از ناكفايتي دريافت غذايي است. افرادي كه سوء جذب چربي دارند مخصوصا احتمال فقدان ويتامين A دارند. فقر ويتامين A در مصرف طولاني مدت اتانول هم يافت مي شود.

 بواسطه كنترل هموستاتيكي كه كبد اعمال مي كند سطوح سرم با ذخيره كبدي مرتبط نيستند.بتاكاروتن ممكن است در هيپوتيروئيدي و هيپرليپيدمي ناشي از ديابت افزايش يابد.

مصرف OCP مي تواند موجب افزايش سطوح سرمي شود. 

 فلورانس/ UV اسپكتروسكوپي و سايرروش ها; در حال حاضر روش انتخابي HPLC است كه همزمان مي توان سطح ويتامين E را هم تعيين كرد.

هيپرويتامينوزA ممكن است ناشي از افزايش دريافت يا اختلال در دفع مثل ميگزدم٬ ديابت يا بيماري كليوي باشد. اثرات سمي افزايش ويتامين A عبارتند از افزايش فشار داخل جمجمه٬ دسكوامه شدن پوست٬ ريزش مو٬ درد مفصل٬ سردرد٬ تهوع٬ تب٬ سرگيجه و اختلال بينايي.سميت زماني ظاهر مي شودكه سطوح ويتامين A بيشتر از ظرفيت پروتئين اتصالي رتينول(RBP) براي اتصال به آن باشد. بهترين راه تعيين سميت اندازه گيري استرهاي رتينيل است كه به طور طبيعي 5% از كل ويتامين A را شامل مي شوند ولي در سميت ممكن است بيشتر از 30% كل ويتامين A را تشكيل دهند(دريافت بيشتر از 50000واحد در روز).
 
محدوده رفرانس

ng /ml 100-300براي پيوند كليه
*
ng /ml  200-350براي پيوند قلب٬ كبد و پانكراس (12ساعت پس از دوز خوراكي) 
*
C2 Levels  تقريبا 3 تا6 برابر اين سطوح هستند.

 
 
ادامه دارد ...

 

فرهیخته آزمایشگاهی گرامی:

با سلام و درود

احتراما با تشکر از بازدید  شما از نسخه دموی نرم افزار استانداردسازی و کنترل کیفیت    NextLab 

معروض میدارد امکان رویت متن کامل مستندات فقط در لینک های زیر میسر است

و دسترسی به متن کامل سایر مستندات فقط در نسخه اصلی امکان پذیر است

دستورالعمل مدیریت پسماندها

دستورالعمل کاربری دستگاه سل کانتر

دستورالعمل روش انجام آزمایش CBC

شرح وظايف کارکنان نظافت، شستشو و استرلیزاسیون

روش اجرانی ممیزی داخلی

دستورالعمل آماده سازي و اطلاع رساني بيماران جهت نمونه گيري صحيح


با سپاس از بذل توجه شما


نرم افزار مستندات، استانداردسازی و کنترل کیفیت نِکست لَب [ www.NextLab.ir ]