دستور العمل روش آماده سازی و رنگ آمیزی لام پاپ اسمیر مایع

کد سند:
403
کد یکتا:
164
واحد سازمانی:
پاتولوژی
فرآیند:
فرآیند انجام آزمایش
زمان ویرایش:
1395/01/24
ویرایش کننده:
مدیر ارشد آزمایشگاه
شماره بازنگری:
1.0
ضمیمه - مرجع:
توضیحات:

متن سند:
رنگ آمیزی لام پاپ اسمیر مایع


هدف:

هدف نحوه ی صحیح آماده سازی و رنگ آمیزی لام های پاپ اسمیر مایع(Liquid based papsmear) می باشد.

دامنه کاربرد:
این دستورالعمل جهت آماده سازی و رنگ آمیزی لام های پاپ اسمیر مایع(Liquid based papsmear)  در بخش پاتولوژی آزمایشگاه کاربرد دارد.
 
اقدامات وابسته:
-آگاهی از نحوه ی تهیه لام پاپ اسمیرمایع (Liquid based papsmear)
-آگاهی از نحوه ی فیکس کردن لام پاپ اسمیر مایع
-آگاهی از نحوه ی رنگ آمیزی لام پاپ اسمیر مایع
-آگاهی از نحوه ی منونته یا مونتاژ کردن لام
-آگاهی از اصول ایمنی درآزمایشگاه
 
اطلاعات نمونه:
- نوع نمونه: نمونه از واژن و دهانه رحم توسط برس مخصوص گرفته می شود.
- شرایط ظاهری نمونه:
-سر برسی که نمونه توسط آن تهیه می شود باید درون ظرف حاوی محلول مخصوص انداخته شود.
-محلول درون ظرف ریخته نشده باشد.
-اطلاعات لازم باید از فردی که نمونه از او تهیه شده گرفته شود. این اطلاعات شامل: تعداد بارداری(G)، تعداد زایمان(P)، تعداد سقط(Ab)، تاریخ آخرین زمان پریودی(LMP)، تاریخ نمونه گیری، تاریخ آخرین زایمان، در دوران شیردهی بودن یا نبودن، روش جلوگیری از بارداری، علت انجام آزمایش، آیا تحت عمل هیسترکتومی قرار گرفته، آیا تحت رادیوتراپی بوده
-نحوه نگهداری نمونه: نمونه در دمای محیط به مدت 2 هفته قابل نگهداری می باشد. 


تجهیزات و لوازم مورد نیاز
-لام
-لامل
-بسکت مخصوص لام
-چسب لام
-برچسب
قلم الماس
-ظرف مخصوص رنگ آمیزی
-دستگاه سانتریفیوژ
-لوله مخصوص سانتریفیوژ
-سمپلر 50 و 500 میکرولیتر
-سرسمپلر


محلول های مورد نیاز:
-الکل اتانول مطلق و 96 درجه
-گزیلول
-رنگ EA50
-رنگ OG6
-رنگ هماتوکسیلین
-فرمالین
-اسید الکل ٪1
-محلول Cleaning solution
-محلول Cellular base solution
 
روش انجام آزمایش:
-مراحل آماده سازی نمونه :
- ابتدا به نمونه ml2-4 محلول Cleaning Solution اضافه می کنیم. ظرف را خوب تکان می دهیم و می گذاریم به مدت 1 ساعت در دمای محیط بماند.
-بعد از 1 ساعت میزان 3/1 از لوله سانتریفیوژ را از محلول حاوی نمونه پر می کنیم و لوله را داخل دستگاه سانتریفیوژ قرار می دهیم و به مدت 20 دقیقه با دور g3000 در دمای اتاق سانتریفیوژ می کنیم.
-پس از پایان سانتریفیوژ و اطمینان از تشکیل رسوب سلولی، محلول اضافه رویی موجود در لوله ها را به آرامی دور ریخته و برای آبگیزی کامل، آن را به صورت وارونه روی دستمال کاغذی تمیز قرار می دهیم.
-بعد از آبگیری، با سمپلر میزان 300-500 میکرولیتر از محلول Cellular base را داخل لوله حاوی رسوب می ریزیم و حدود 1 دقیقه خوب تکان می دهیم.
-مقدار 50 میکرولیتر از نمونه را به کمک سمپلر به صورت دایره وار به قطر 1.5-2 سانتی متر بر روی لام شماره گذاری شده توسط قلم الماس، گسترش می دهیم. از هر نمونه دو لام تهیه می کنیم و روی هر لام دو دایره از نمونه را گسترش می دهیم.
-نمونه های گسترش داده شده باید حداقل به مدت 1-2 ساعت در دمای اتاق بمانند تا کاملا خشک شوند. افزایش زمان خشک کردن از 2 به 24 ساعت هیچ تاثیری در کیقیت رنگ آمیزی، مرفولوژی سلولی و تک لایه شدن سلول ها ندارد.

-روش رنگ آمیزی:
در رنگ آمیزی لام های پاپ اسمیرمایع از روش رنگ آمیزی پاپانیکولائو استفاده می کنیم. بسکت حاوی لام پاپ اسمیرمایع به ترتیبی که در زیر گفته شده درون محلول ها گذاشته می شود.
-الکل اتانول 96 درجه (20 دقیقه)
-شستشو با آب
-رنگ هماتوکسیلین (5 دقیقه)
-شستشو با آب
-اسید الکل ٪1 (5-10 ثانیه)
-شستشو با آب
-الکل اتانول 96 درجه (8 دقیقه)
-رنگ OG6 (4دقیقه)
-الکل اتانول 96 درجه (8 دقیقه)
-رنگ EA50 (5 دقیقه)
-الکل اتانول 96 درجه (8 دقیقه)
-الکل اتانول مطلق (6 دقیقه)
بعد از مراحلی که بالا ذکر شد لام ها در دمای محیط می گذاریم تا خشک شوند سپس به مدت 10 دقیقه به منظور شفاف سازی لام ها، آنها را در گزیلول قرار می دهیم.
-مونته یا مونتاژ کردن لام:
بعد از خارج کردن لام ها از گزیلول روی هر لام چند قطره چسب لام می ریزیم و لامل را روی لام قرار می دهیم.
ادامه دارد ...

 

فرهیخته آزمایشگاهی گرامی:

با سلام و درود

احتراما با تشکر از بازدید  شما از نسخه دموی نرم افزار استانداردسازی و کنترل کیفیت    NextLab 

معروض میدارد امکان رویت متن کامل مستندات فقط در لینک های زیر میسر است

و دسترسی به متن کامل سایر مستندات فقط در نسخه اصلی امکان پذیر است

دستورالعمل مدیریت پسماندها

دستورالعمل کاربری دستگاه سل کانتر

دستورالعمل روش انجام آزمایش CBC

شرح وظايف کارکنان نظافت، شستشو و استرلیزاسیون

روش اجرانی ممیزی داخلی

دستورالعمل آماده سازي و اطلاع رساني بيماران جهت نمونه گيري صحيح


با سپاس از بذل توجه شما


نرم افزار مستندات، استانداردسازی و کنترل کیفیت نِکست لَب [ www.NextLab.ir ]